ChromaCon公司位于瑞士苏黎世,是一家致力于连续流层析技术开发的企业,其自主研发的Contichrom CUBE连续流层析系统,采用最优化的2柱位设计,可运行多种层析模式,如标准批处理过程、Capture SMB、MCSGP、N-Rich等,实现了层析新技术与层析系统软硬件设计的完美结合,使得设备成本更低,构造更为简化,产品产率更高,并可使层析填料、缓冲液等成本投入大为节省。
届时,必一体育app还将携Contichrom Discovery层析系统、QuikSep EC手动层析柱、QuikSep SC简易层析系统等多套设备共同亮相,可为广大客户提供操作演示。
传统层析工艺,由于流穿效应,有40-60%的填料是无法被利用的,从而使得载量和处理量大为受限。Capture SMB用于优化捕获环节,作为最简单和最优化的2柱位设计,可使纯化效率显著提高,并且使填料用量大为缩减。
Capture SMB是将第一根层析柱的抗体/蛋白流穿继续上样至第二根层析柱,待第一根层析柱完全满载后,方结束其上样进行淋洗,并继续进行洗脱、再生、再平衡操作,而此时第二根层析柱会独立进行上样操作。通过切换柱位操作,保证2根层析柱的洗脱、再生、上样等操作交替衔接进行,从而实现工艺与系统硬件设计的完美结合,使填料利用率最大化,累积用量大为缩减。
举例说明
Mabselect SuRe:静态载量60 g/L,使用寿命200 cycles;
处理量:600 kg mAb,填料体积:均为100 L。
MCSGP(多柱逆流溶剂梯度纯化)
MCSGP(Multicolumn Countercurrent Solvent GradientPurification)用于精纯环节,可有效克服SMB(模拟移动床)仅适用于二元分离、无法实现线性梯度的缺点。
传统的层析精纯工艺,必须在收率和纯度之间做出权衡,两者此消彼长。如何在保证获得高纯度产品的同时,得到高收率,一直是层析精纯工艺所面临的难点。
MCSGP工艺,可将含有不纯组分的产品回收在一个封闭的环内,进行循环式的层析操作,从而最大限度地提取纯产品,使得收率和纯度二者兼得。
应用案例
N-Rich工艺是微量物质的富集过程,比如将产品的相关杂质选择性地富集在一个循环的层析过程中,待富集至目标量,再进行洗脱回收。该方法特别适用于分离与产品有关的杂质,如异构体和聚集体,并同时用于发现研究。
应用案例
Discovery技术简介
Discovery层析技术可将多步层析整合为一步,从而缩短纯化时间,提高纯化效率。第1步层析的产物无需进行收集,通过在线稀释,可直接上样至第2根层析柱。即第1步层析的洗脱与第2步层析的上样同时进行,使纯化周期显著缩短。ContichromDiscovery系统可额外扩展出35个入口,实现高通量纯化。
应用案例
第一步Protein A;第二步CIEX;第三步Desalting(分子筛脱盐换液)。
在该过程中,Protein A的洗脱组分经过在线稀释,直接上样至CIEX层析柱,CIEX进行线性洗脱,去除降解物及聚集体,将目标组分直接上样至脱盐柱。三步层析紧密衔接,前一步层析的洗脱与后一步层析的上样同时进行,使得纯化效率显著提高。
最终产品经SE-HPLC检测,纯度高达99.5%,二聚体含量仅为0.5%,比Protein A - Desalting两步层析所得产品的二聚体含量降低近6倍,该产品可直接用于氨基酸序列测定、二硫键测定以及糖型分析等高纯度要求的检测。
Discovery高通量(HT)型系统,采用Protein A - CIEX- Desalting三步向导模块,每次上样10 mL单抗上清液(1.0 mg/mL),每次产量均≥6.5 mg。单个样品的三步纯化耗时约为74 min,在24 h内纯化出多达19个样品,而且该时间包含了层析柱的清洗环节。该系统持续运行5天,纯化样品总数量高达91个。
培训日程安排:
2018.09.19:CaptureSMB原理及功能演示。
2018.09.20:MCSGP、N-Rich原理及功能演示。
报名及培训说明:
1. 培训费用:8000元/人。
2. 培训地点:深圳市南山区高新中一道10号深圳高新区生物孵化器2-412
3. 报名联系:张永阔 手机:13910866728 E-mail:zyk@prep-hplc.com QQ:2355545357
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