新型反相聚合物填料的性能及应用实例
反相聚合物填料一般是以聚苯乙烯和二乙烯基共聚物或聚甲基丙烯酸酯为基体的。产品可以替代ODS-C18键合硅球固定相用于反相色谱法分离,它比反相硅胶具有更高的化学稳定性,pH适用范围广、使用寿命长、可以在强酸、强碱介质下使用,可以用多种有机溶剂作为洗脱剂,可反复使用等特点。一种常见的高科技色谱分离填充材料。
非索非那定的分离纯化
实验方法:
1 硅胶柱层析
取硅胶层析柱(20x400mm,柱体积 90ml),装填硅胶(200-300 目)。将抽提液油状物取一定量(约含非索非那定 100mg)溶解于 2ml的乙醇中,并与 1g 硅胶混合均匀,在通风条件下,让乙醇挥发,待其完全干燥后上柱。然后进行柱层析,洗脱剂为乙酸乙酯:乙醇=90:10,流速:0.5ml/min,分部收集:5ml/试管。使用 TLC 和 HPLC 检测每个收集管中洗脱液的组分。
2 AMBERCHROM CG161 柱层析
使用 10x180mm 柱,柱体积 10ml。湿法上柱,样品为一定量的抽提液油状物(约含非索非那定 80mg)。梯度洗脱:40%乙醇(10 倍柱体积)然后用 80%乙醇洗脱(10 倍柱体积);流速:0.5ml/min;分部收集:5ml/试管。使用 TLC 和 HPLC检测每个收集管中洗脱液的组分。
实验结果:
1 硅胶柱层析结果
硅胶柱层析过程中发酵液中未转化的底物(特非那定)先被洗脱下来,然后是转化的一个副产物,接下来洗脱出来的是产物非索非那定。结果显示,用硅胶分离,产物出峰较晚,拖尾现象严重,各个组分之间有交叉现象,分离效果较差。
问:反相聚合物树脂一般如何再生和保存?
答:
再生处理方法:使用甲醇、丙酮或以稀酸、稀碱及水反复再生处理,即可恢复树脂的吸附能力。
保存方法:再生后的大孔吸附树脂可用一定浓度的醇浸泡以备下次使用。