胰岛素药物发展历程
年代 | 胰岛素种类 | 主要分离纯化方法 | 胰岛素纯度 |
90年代末-至今 | 胰岛素类似物 | 表达系统的改进 离子交换和制备型高效液相 | ＞99% |
80至90年代 | 重组人胰岛素 | 离子交换和制备型高效液相色谱 | 99% |
50至70年代 | 动物胰岛素 | 常规层析法 离子交换和分子筛层析 | 约95% |
20至40年代 | 动物胰岛素 | 结晶和重结晶 | 约80% |
司美格鲁肽纯化工艺举例
多肽的分离纯化工艺举例（2-3步）
离子交换色谱分离材料
1. Toyopearl NH2-750F为一款耐盐型的阴离子交换填料，主要官能团为伯胺基，同时也具有很弱的疏水模式作用，从而使其具有耐盐性。
2. 一般而言，细胞液中都含有0.1-0.15mol的NaCl，使用普通的离子交换填料，必须经过脱盐的处理，但是针对NH2-750F这款填料，可以直接进行上样无需脱盐，大幅度节省操作的时间和成本。
3. 同时，这款填料孔径较大，所以分离大分子的效果也非常明显。
反相色谱分离材料
1.高效液相反相色谱技术分辨率高。
2.精细纯化单元：2-3步高效反相色谱精纯步骤，降低离子交换不能去除的杂质含量（如二聚体杂质、A链8-9位残基之间肽键断裂杂质、酰胺残基的脱氨杂质等）。
3.硅胶反相填料精纯关键点：分离选择性、载样量和回收率、填料化学稳定性（耐受强碱在线清洗，CIP)。
测试条件条件：0.1M NaOH/EtOH=50/50
H&E（DICP）填料的碱性耐受性明显优于市场上稳定性最好的Kromasil填料，具有优异的化学稳定性。
应用案例-多肽产品
多肽纯化设备的选型
1. 分子筛填料设备选型
使用分子筛填料要求是填料装填高度大于75cm，层析柱柱效要求高，上样量比较低，只有填料体积的1%；目前多肽中应用相对较少。
2. 离子交换填料设备选型
用于离子交换填料，疏水填料等，用于填料筛选和工艺开发及中试项目。
用于离子交换填料，疏水填料等，用于手动层析柱，简易层析系统或全自动层析系统。
3. 反相填料和聚合物填料设备选型
反相C18/C8，聚合物填料走制备液相和中高压DAC设备，可以保证产品高柱效和产品分离度。
C18中高压层析系统和动态轴向压缩柱产品，用于客户的工业放大。
厦门客户 2020年1L防爆系统+DAC100；装填填料是Cytiva SOURCE 30Q或东曹 Super Q-650M及DEAE 5PW(20μm) 及国内同类型产品。
