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亲水作用色谱柱是一种直接分离极性和亲水性化合物的色谱技术，为了便于理解，我们可以把它看作为是一种用反相色谱溶剂作流动相的正相色谱。因此，HILIC是亲水性的流动相，以水、有机溶剂和缓冲盐作为流动相。常见的HILIC方法采用50%~90%有机溶剂和一定比例的水，并且含有低浓度的缓冲盐。如乙腈/水/醋酸铵体系。在HILIC方法中，洗脱顺序和反相色谱正好相反，即极性越大，保留时间越长。