硅胶表面进行修饰后具有独特的吸附性，同时，硅胶表面键入羟基的技术已经成熟。Diolsilica 这种类型的硅胶过去并没有得到普遍应用，主要是由于其具有普通硅胶所不具备的独特优势。日本富士硅化学有限公司反复评估 Diol silica 产品的反应过程、作用及特性，证实此产品在正相层析时具有普通硅胶所不具备的独特性质。到目前为止，Diol 硅胶填料已出售，并用于较难复合物的分离。

问：选择何种 HILIC 色谱柱型号开始实验？

答：内径 4.6mm 的色谱柱适合流速为 0.5-3ml/min 的分析，而内径 2.1mm 的色谱柱更适合用于 HILIC-MS分析。色谱柱的长度取决与具体的应用。如不确定自己的需要，粒径 5um，长度 150mm(P/N2712-155)的色谱柱是不错的选择。快速简单样品的分离可以选择短柱分析(如 50mm， P/N2712-055)的色谱柱，而更复杂的分离需选择更长些的柱子 (如 250mm，P/N2712-255)。

问：内径为 4.6mm，2.1mm 或 1.0mmZIC-HILIC 色谱柱的推荐流速为多少？

答：对于内径为 4.6mm，2.1mm 和 1.0mm 所有规格的色谱柱而言，推荐使用的流速分别为 0.5ml/min，.1ml/min，或 0.02ml/min，或比推荐流速稍大、稍小些。举例来说，2.1mm 的色谱柱流速为 0.1ml/min时可达到最大效率。流速达 0.5ml/min 时，分离效率下降为最大效率的 20%，如果分辨率能达到要求，它可以节省时间。这个规律也适合于其他内径的 HILIC 色谱柱。

问：ZIC-HILIC 色谱柱带什么功能团？

答： 被称为”硫代甜菜碱”官能团。 

问：HILIC 分离中孔径的作用？通过 ZIC-HILIC 色谱柱从小分子化合物中分离丙氨酸，使用粒径 3.5um，柱尺寸为 150×2.1mm 的分析柱，20×2.1 的保护柱，对于这个应用，选择孔径 100A 还是 200A 的色谱柱，那款更适合一些？

答：在这个应用中，这类产品都会起作用，但是我们推荐粒径 3.5um，孔径 200A (p/n 2702-152)的色谱柱，小孔径提供更高的容量因子。

问：我们使用 ZIC-HILIC 与 ICP-MS 相连，但是关心流动相中有机相的含量，与乙腈有什么不同？

答：通过使用二氧六环或者其他的，或更高沸点的溶剂可以减少碳消耗的问题，但是最终取决与样品和应用的本质。

问：ZIC-HILIC 和硅胶 HILIC 色谱柱有什么区别？

答：ZIC-HILIC 色谱柱装填的是键合有两性离子官能团的固定相，而硅胶 HILIC 色谱柱是纯硅胶。

ZIC-HILIC 色谱柱固定相创建了一个稳定的水层，把水稳固在固定相表面。这使得等度和梯度模式下色谱柱更稳定。也允许进样水样(如果不是使用太大的体积)。该色谱柱也有很好的使用寿命。硅胶 HILIC 色谱柱有着连续色谱相关的一些问题，如：吸附因素，对某些化合物峰拓宽，平衡慢。此外，它对改变流动相中水的比例也十分敏感，由于其动力学慢使其很难进行梯度洗脱。据报道，纯硅胶色谱柱使用寿命也短些。

问：对 ZIC-HILIC 色谱柱和硅胶 HILIC 色谱柱而言，有效的 PH 范围是多少？

答：ZIC-HLIC 色谱柱带有带电的两性离子官能团，但其整体而言表现中性亲水型。由于流动相的 pH 用于中度离解和样品的保留，其会产生独一无二的选择性。硅胶基材的 ZIC-HILIC 色谱柱可以使用的 pH 范围是 2-8，聚合物基材的 ZIC-pHILIC 色谱柱可以使用的 pH 范围为 2-10，相反，一个纯硅胶色谱柱在 pH大于 4 时，其表现为阳离子交换，硅胶表面会产生官能团(-OH)，碱性化合物将结合的更强，需要更多的缓冲液洗脱，这对 MS 是不利的。

问：ZIC-HILIC 和 ZIC-pHILIC 色谱柱相关参数(PH 范围、最大压力、最大温度、孔径、表面积、碳含量)各是多少？

答：碳含量与 HILIC 色谱柱无关，而是反相柱参数。