TOYOPEARL HW 和 TSKgel PW 型尺寸排阻树脂是所有东曹公司离子交换、疏水作用和亲合层析填料产品的基质。在初步聚合反应产生特定的填料粒径和孔径后,通过化学修饰改变树脂表面特征以获得特定的产品。TOYOPEARL HW产品属于羟基化的聚甲基丙烯酸类树脂。通过化学手段,获得不同粒径(30μm或以上)和孔径大小的TOYOPEARL HW型尺寸排阻填料。它们与TSKgel PW填料相比,交联度更低。低交联使得在生产以TOYOPEARL HW为基质的离子交换和疏水填料时,能够提供更多的配体固定化反应或修饰位点。因此,与相应的TSKgel PW 基质相比,修饰后的TOYOPEARL HW 树脂填料具有更高的动态吸附载量。HW 和 PW 树脂填料由于具有同样的基质骨架,相同类型官能团的填料对于蛋白质或杂质的保留具有相似的选择性。 TOYOPEARL HW 树脂填料,可以在高线性流速下使用,且能承受高达3bar的工作压力。
Toyopearl | 分子量排阻范围 | Sephadex | |
右旋糖酐 | 蛋白 | ||
HW-40 | 100-7000 | 100-10000 | LH-20,G-25 |
HW-50 | 500-20000 | 500-80000 | G-75,G-100,G-150 |
HW-55 | 1000-200000 | 1000-700000 | G-100,G-200 |
HW-65 | 10000-1000000 | 50000-1000000 | 6B,4B |
HW-75 | 100000-10000000 | 500000-50000000 | 4B,2B |
填料粒径 S级:20-40μm
F级:30-50μm
C级:50-100μm
EC级:100-300μm(只针对HW-40提供EC级粒径的填料)
与糖相比,由于蛋白结构紧凑,因此同类分子筛填料对糖和蛋白的排阻界限有所差别。Toyopearl填料的骨架为含羟基的亲水性聚甲基丙烯酸树脂,由于不含糖基,与多糖类填料相比,不会和糖类样品发生非特异性相互作用。
使用HW填料对各种糖类进行分析的应用汇总表
化合物 | Toyopearl填料 | 备注 |
酸性环糊精/Acidic cyclodextrin | SP-650C,HW-40F | 专利 |
酸性寡糖/Acidic oligosaccharide | DEAE-650M | 1-100 mM KCl梯度 |
抗肝炎多糖/Anti-hepatitis polysaccharide | DEAE-650C | 专利 |
支链低聚果糖/Branched fructooligosaccharide | HW-40S | 专利 |
致癌物抑制剂/Carcinogen promoting inhibitor | HW-65F | 专利 |
性腺A/Gonaderan A | DEAE-650 | 专利 |
紫草多糖/Lithosperman A | DEAE-650 | 专利 |
麦芽戊糖苷/Maltopentoside | HW-40S | 流动相:水 |
多糖/Polysaccharide | HW-65F | 0.1 M NaCl |
淀粉/Starch | HW-75F | |
TX-1多糖/TX-1 polysaccharide | HW-65F | 专利 |
低分子生物活性物质的分离
化合物 | Toyopearl填料 | 备注 |
Acakyphidins | HW-40 | |
花青素/Anthocyanin | HW-40F | |
蒽醌/Anthraquinone | DEAE-650C | 专利 |
Black vinegor | HW-50F | 流动相:水 |
儿茶酚/Catechin | HW-40 |
栗瘿鞣质/Chestanin | HW-40F | 流动相:50%的甲醇 |
地高辛/Digoxin | HW-40F | 流动相:50%的甲醇 |
Epigarocatechin | HW-40 | |
黄烷/Flavan | HW-40C | |
类黄酮配糖类/Flavonoid glycoside | HW-40 | |
没食子酰熊果酚苷/Galloylarbutin | HW-40F | |
异黄酮/Isoflavonoid | HW-40 | 流动相:甲醇/水=70/30 |
哇巴因/Ouabain | HW-40F | 流动相:50%的甲醇 |
植物生长激素/Plant growth hormone | HW-40 | |
多酚/Polyphenol | HW-40C, HW-40EC | |
花色素低聚物/Proanthocyndin oligomer | HW-40F | 专利 |
原花青素/Procyanidine | HW-40S,HW-40F | |
丹宁酸/Tannin | HW-40 | |
茶黄素/Theaflavin | HW-40 | 专利 |
结论:
Toyopearl HW-40 系列填料具有很多的优势:
1. 优异的刚性强度和化学稳定性
* 可以放大至更大的制备规模和获得更高的流速(适用于超过200L的层析制备柱)
* 适用于强碱溶液
2. 4种不同的粒径可供选择
* S级(30μm)、F级(45μm)、C级(100μm)和EC级(200μm)
* 高分辨率、高流速。
3. 适用于水和各种有机溶剂
* 甲醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等等
* 根据样品的溶解性来选择合适的有机溶剂(流动相)
Toyopearl 填料使用上的注意点:
1. 装填前的匀浆准备
Toyopearl系列产品出货时保存在20%的乙醇中(乙醇/水=20/80)。需要注意的是,如果需要在氯仿、四氢呋喃、乙酸乙酯等非极性溶剂中使用时,需要进行逐步置换,而不能进行互不相溶的溶液间的直接替换。
2 填料的装填
Toyopearl填料的刚性强度好,相比琼脂糖、葡聚糖基质的软胶来讲,更适宜在高流速下进行装填以便获得更高柱效、更高分辨率的层析柱。