一、TOYOPEARL Sulfate-650F的简介
1. 带有硫酸根官能团的阳离子交换填料
• 官能团为硫酸根(SO4-) ,与S-、SP-和CM-等类型相似,同为阳离子交换填料。
• 对抗体等蛋白有很高的吸附载量。
2. 可有效去除抗体中的多聚体
• 相较于其他阳离子交换填料,对多聚体有着更高的分离效果。
• 在pH低于5.0、并含有0.15 mol/L的NaCl缓冲液中仍然可以结合抗体,具有耐盐性。
• 可作为Protein A层析的后续纯化步骤。
3. 有类似于肝素亲和填料的分离纯化效果
• 可以应用于AT-III和其他相关蛋白的分离纯化。
• 有望应用于病毒和疫苗的分离纯化。
4. 适用的缓冲液pH范围
• 一般可以用于pH 4-12的缓冲液中。
• 可以用pH 3-13的清洗液进行短时间的CIP处理。
二、TOYOPEARL Sulfate-650F的基本参数
性能指标 | 规格参数 |
蛋白吸附载量 静态 动态 | ≥114g/L(human IgG) ≥95g/L |
离子交换容量 | ≥0.53eq/L |
粒径 | ≥80%(30-60μm) |
菌落总数 | ≤100 CFU/ml |
内毒素等级 | ≤10.0 EU/ml |
不溶物 | ≤0.2%(干胶) |
异物(colored) | ≤6 颗粒 |
出货溶剂:含0.2mol/L醋酸钠的20%乙醇溶液
三、TOYOPEARL Sulfate-650F适用样品
• 单克隆抗体
• 血浆蛋白、凝血因子
• 病毒、VLP、疫苗
• 重组蛋白
• 碱性蛋白
四、TOYOPEARL Sulfate-650F的主要特点
• 高载量
• 多聚体分离
• 耐盐的阳离子交换填料
• 与肝素亲和作用相似(硫酸根官能团)
五、TOYOPEARL Sulfate-650F的应用条件
1. 单克隆抗体多聚体的分离纯化
• 对IgG可达到100 g/L的高载量。
• 可以作为Protein A亲和层析的后续纯化步骤。
2. 在pH 5 以下具有耐盐性
• 在pH 4.7、0.15 mol/L NaCl的缓冲液中可以对样品进行吸附。
• 在Protein A 亲和层析或前处理后可以直接进行上样。
3. 硫酸根官能团的特异性相互作用
• 与肝素亲和层析相似,可以与凝血因子、疫苗或病毒结合。
• 可以用0-1 mol/L的NaCl进行盐梯度洗脱。
• 与竞争对手的Sulfate填料具有类似的吸附性能,但是Sulfate-650F具有更高的吸附载量(某些填料由于孔径小,所以蛋白只能结合在填料的表面)。
4. 常用的分离条件
• 上样缓冲液的pH要控制在5.5以下。
• 优化缓冲液的pH和盐浓度能够获得更好的分离效果。
• 当缓冲液的pH为4.2时,即使在0.3mol/LNaCl的缓冲液中也能够获得很高的吸附载量。
六、多种不同的阳离子交换填料对单体和多聚体的分离度比较
在pH 5.5的缓冲液中,mAb单体和多聚体回收率的比较
七、TOYOPEARL Sulfate-650F在类似于肝素亲和填料方面的应用展望
1. 类似于肝素亲和填料的分离纯化作用*
• 凝血因子:Factor VII、Factor IX、Factor X、凝血酶、AT-III
• 组织纤溶酶原激活物(TPA)
• 脂肪酶、核酸酶有关(如限制性内切酶)、胶原酶、脂蛋白
2. 利用硫酸根官能团的相互作用*
• 病毒、疫苗
*目前使用TOYOPEARL Sulfate-650F纯化的除了核糖核酸酶A和AT-III以外,暂时没有其他实例。
八、单克隆抗体纯化工艺实例
实例1.
实例2.
实例3.
九、订货信息
货号 | 描述 |
023468 | TOYOPEARL Sulfate-650F, 250ml |
023469 | TOYOPEARL Sulfate-650F,1L |
023470 | TOYOPEARL Sulfate-650F,5L |
023471 | TOYOPEARL Sulfate-650F,50L |
023472 | ToyoScreen Sulfate-650F, 1ml×6 |
023473 | ToyoScreen Sulfate-650F, 5ml×6 |