在生物技术领域，常使用亲和色谱法进行病毒、蛋白的纯化。亲和色谱法属于吸附色谱法的一种，目标物质有选择地吸附于色谱柱填料的配体上，然后通过更改缓冲液达到分离、回收的目的。使用亲和色谱法回收目标成分，可以比凝胶过滤或离子交换色谱法的精度高出很多。
QuikSep Sulfate是一种特定的亲和填料，适用于部分病毒、病毒样颗粒以及某些特定的抗原和蛋白（见表2）的分离纯化。
特点：
1. 快速、简单（一步纯化）。
2. 载量高。
3. 易于放大。
表1：性能参数
介质 | QuikSep Sulfate |
基质 | 高刚性琼脂糖 |
粒径范围 | 45-165µm |
平均粒径 | 90µm |
溶菌酶载量 | ≥3mg/ml 介质 |
pH稳定性 | 5-12（长期） 5-12（短期） |
操作压力 | ≤0.3MPa |
流速 | （16mm× 300mm，0.1MPa）300cm/h |
贮存溶液 | 20%乙醇 |
贮存温度 | 4-30℃ |
表2：QuikSep Sulfate适用性
Viruses | Viral/Microbial Agents |
Rabies Influenza Japanese Enchephalitis Feline Leukemia Feline Herpes Feline Calicivirus Respiratory Syncytial Virus Human Herpes Simplex Human Measles Human Parainfluenza | Herpes Simplex gA and gB Glycoprotein Subunits Hepatitis B Surface Antigen Filamentous Hemagglutinin from B. pertussis Leucocytosis Promoting Factor Hemagglutinin |
QuikSep Sulfate纯化狂犬病毒层析工艺
1. 层析柱
介质：QuikSep Sulfate； 规格：1ml 预装柱
2. 样品预处理
高倍浓缩后的样品用平衡液稀释 20 倍，上样前 0.45um 过滤，0.45um 过滤。
3. 缓冲液
A：10mM PB，pH 7.2； B：10mM PB，1M NaCl，pH 7.2。
备注：所有溶液需 0.45um 过滤。
4. 纯化过程
流速：1ml/min 或者 30cm/h；
平衡：溶液 A 平衡 10CV（CV 指柱体积，下同）；
上样：上样 30CV；
清洗：溶液 A 平衡 10CV；
洗脱：溶液 B 洗脱 10CV，收集洗脱液。
5. 纯化图谱
5. 检测结果
体积 （ml） | 蛋白浓度 （ug/ml） | 抗原含量 （IU/ml） | 蛋白去除率 （%） | 收率 （%） | 浓缩倍数 | 纯化倍数 | |
原液 | 30 | 615 | 1.51 | 94 | 75.4 | 11 | 13 |
流穿液 | 30 | 557 | 0.22 | ||||
洗脱液 | 2 | 531 | 17.08 |
7. 结论
该悬浮培养狂犬病毒纯化工艺中，病毒与 QuikSep Sulfate进行吸附结合，洗脱液中蛋白去除率≈94%，回收率≈75.4% 。
8. 订购信息
产品 | 规格(ml) | 货号 |
QuikSep Sulfate | 25 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 100 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 500 | HZ1010-1 |
QuikSep Sulfate | 1000 | HZ1010-1 |
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