什么是 HILIC？

亲水作用液相色谱(HILIC)是分离多种类型极性化合物和亲水性化合物最有效的色谱技术。简单的讲，HILIC 是正相色谱分离的一种，但其使用反相中常使用的流动相。 一般而言，HILIC 的洗脱顺序与 RPLC相反，保留随着分析物的带电性和亲水性增加而增强。这保证了 RPLC 色谱柱上无保留化合物的直接分离。

HILIC 是一款具有亲水固定相的色谱柱。可以使用水，缓冲液和高比例与水混溶的有机相作为流动相。典型的 HILIC 应用可以使用有机溶剂占 50-95%的缓冲液体系，缓冲盐应该在有机溶剂中具有很高的溶解性，如醋酸铵的乙腈溶液。

极性化合物和亲水化合物类型

HILIC 色谱柱可以分离极性化合物和亲水性化合物。ZIC-HILIC 提供的选择性适用于分离很多种类的分子如：带有亲水性或带电性的官能团。如糖类、代谢物、酸性和碱性化合物、有机或无机离子、金属复合物、氨基酸、肽、蛋白质片段、植物或细胞提取物等等。

这些物质通常来讲具有很小或负的 LogP 值，在反相柱上保留很弱。ZIC-HILIC 色谱柱就是分离极性和亲水性物质的色谱柱,其选择性与反相色谱柱具有正交性。 

HILIC 色谱柱的分离机理

目前，HILIC 色谱柱是通过进样分析溶质在流动相和 HILIC 固定相亲水表面的水层分区而进行保留。分析物亲水性越强，分区平衡越易转向固定相固定的水层，因此分析物的保留也越强

尽管人们已经确认了固定相处于有机溶剂和水混合条件下，亲水表面可以固定水层，但是 HILIC 分区理论也仅仅是依靠间接的证据。有很多研究者也认为这是复合的分离机理，包括氢键作用和偶级－偶级作用等，可能都起到重要的分离作用。有机溶剂的类型及浓度，缓冲盐的类型及浓度，,以及 PH 变化都可以影响分析物的保留。