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第十七期 TSK-GEL PW型凝胶色谱柱

2015年02月11日source:管理员
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TSK –gel PW 系列 GPC 凝胶柱填料是亲水、刚性、化学和机械性能很好的球形多孔高聚物。使用 PH 值范围是 2-12,可以使用含有 50%的混合有机溶剂为流动相。用于分离蛋白质、多肽、寡糖、DNA、RNA、水溶性的有机聚合物和其他水溶性大分子样品等。


SKgel G-Oligo-PW 色谱柱

TSKgel G-Oligo-PW色谱柱是一款分析非离子型和阳离子型低聚物的专用色谱柱。由于受残存阳离子基团的影响,该款色谱柱不推荐分离阴离子物质。TSKgel G-Oligo-PW色谱柱在聚乙二醇和聚环氧乙烷的校正曲线与TSKgel G2500PWXL相同。


TSKgel G-DNA-PW 色谱柱

TSKgel G-DNA-PW色谱柱可以分离分子量很大的多核苷酸,如:500-5,000 个碱基对中DNA,和RNA片段。双链DNA片段排阻限要比rRNAS低,表明双链DNA片段要比相同分子量的rRNAS有更大的分子结构。TSKgel G-DNA-PW色谱柱填料孔径大于 1000A,粒径为 10um。


TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL色谱柱

当样品分子量未知,或分布范围很宽时。推荐使用TSKgel GMPW 和TSKgel GMPWXL这两款混合填料色谱柱。TSKgel GMPW色谱柱装填有G2500,G3000 和G6000PW型色谱柱填料。TSKgel GMPWXL色谱柱装填有G2500,G3000 和G6000PWXL型色谱柱填料。二者提供了很宽的样品分子量分离范围。混合模式的色谱柱对葡萄糖和聚乙二醇的校正曲线很窄,线性范围在 100-1,000,000Da。TSKgel GMPW系列色谱柱要比使用串联色谱柱系统更节省时间和成本。


问:什么是色谱柱的再水化现象,如何避免?


答:TSK-GEL 液相色谱柱的脱水现象,可能是因为使用不当或长期放置保存过程中造成的。有些 TSK-GEL玻璃色谱柱中由于没有气密密封圈,这种情况下色谱柱会随时间而易发生干燥现象。对于其他的所有种类色谱柱如不锈钢或玻璃柱等,如果柱栓未拧紧或者使用过程中空气意外进入到色谱柱中,均可能发生柱子干燥的情况。很容易就可以辨认到玻璃色谱柱出现的脱水现象,因为可以很容易地看到干燥的填充物与柱壁分离的现象。我们推荐采用下列步骤,以消除色谱柱的脱水现象:


1. 按照相反的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;


2. 不要将色谱柱与检测器相连。


3. 以推荐最大流速的一半流速,使用滤过的 20%乙醇超纯水溶液进行色谱柱的过柱;注意:反相色谱柱需要使用 60%的乙醇。


4. 继续重复上述程序,直到您确信色谱柱已经再水化处理完毕。再水化处理可能需要几个小时的时间,这取决于色谱柱的尺寸大小;


5. 按照正确的流动方向将色谱柱连接到液相系统上;


6. 如果有机物不是正常流动相的一部分的话,要使用 3 个柱体积的超纯水冲洗色谱柱以去除有机物。


7. 使用上样缓冲液进行柱平衡(通常使用 3-5 个柱体积);


8. 使用 QC 测试方法评价柱子的性能,以确保色谱柱能够正常使用。


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