如何选择层析填料                                                                                                                                           

●五大类层析方法  1.尺寸排阻（SEC）

                  2.离子交换（IEX）

                  3.亲和层析（AFC）
                  4.疏水层析（HIC）

                  5.反相层析（RPC）

●介质—颗粒越细、大小越均匀，分辨率越高，但反压亦较高。

●物理稳定性—能承受高流速，同时保持柱床体积和结构稳定，省去了每次重新装柱的流程，提高重复性。

●化学稳定性—能承受极端pH，高盐，利于开发分离条件和在线清洗（CIP），大大延长介质寿命和提高重复性。

若对目标蛋白或者样品不大了解，可以尝试以下方法：

●使用分离范围宽广的凝胶过滤介质，依据分子量将样品分成不同组分。
●用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白，一步即可得到高纯度样品；也可以用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质。
●体积大的样品，往往使用离子交换层析来浓缩和粗纯化；高盐洗脱的样品再用疏水层析纯化。

●疏水层析用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱的样品又可直接上离子交换介质；两种方法常被交替使用。

对体积不同的柱子来说，体积流速不能直接用作比较，一般都换算成线性流速，再做比较：

检测装柱效果一般用＜0.5%（~30μm介质）或＜2%（~90μm介质）柱体积的1%丙酮测试柱效和峰形。

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