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第一百零一期 花青素分离纯化

2017年11月13日source:管理员
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花青素简

    花青素(Procyanidins)是由一定数量的儿茶素、表儿茶素缩合而成的聚合物,属于酚类化合物中的类黄酮类,广泛存在于各种植物的核、皮或籽中,如葡萄、松树皮、杏壳、樱桃花、山楂叶、云杉叶等。目前食品工业上使用的色素多为合成色素,几乎都有不同程度的毒性,长期食用会危害人的健康,因此,天然色素逐渐引起了科研工作者的关注。花青素作为一种天然食用色素,不仅安全、无毒、资源丰富,还具有一定营养和药理作用。研究表明,原花青素具有抗氧化、清除自由基、护肝解毒、降血压、降血脂、消炎、抗癌、治疗心血管疾病等功效,在食品、化妆、医药 方面有着巨大的应用潜力。


花青素纯化方法

    目前花青素的纯化多采用柱层析法、液相萃取法、固相萃取法、膜分离技术等。其中柱层析是近年来最常用的花青素提纯方法之一。

    花青素的分离纯化多选择各种树脂来去除提取物中糖、有机酸、矿物质及其他水溶性杂质。


大孔吸附树脂法

    早期分离花青素的填料多采用氧化铝、甲醛酚醛树脂、聚酰胺、聚乙烯吡咯烷酮等。如今应用比较多的是XAD 7HP,XAD 4,HP20,AB-8。

    王璐等确定AB-8吸附花青素的最佳条件是上样浓度为7.5mg/ml,吸附时间为4h,吸附流速为3 BV/h,用25%~30%浓度乙醇进行洗脱时,得到纯度>95%、低聚体含量为67.8%的原花青素样品。


离子交换树脂法

    如今使用较多的是Amberlite CG-50,DOWEX50W×8。


凝胶层析法

    多采用Sephadex LH-20,Sephadex G-25,Toyopearl HW-40F等。


花青素的HPLC分析

    1.选用的色谱条件为:色谱柱为Lichrospher 5 -C18柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈和10% 醋酸重蒸水溶液为流动相,洗脱梯度为90%~80%,洗脱时间为30min时,分析效果较好。在六个品种紫甘薯中,紫A4花青素含量最高为4.6058,川山紫花青素含量最低为2.0249,紫A1为3.1608、浙紫为4.5162、京薯6号为4.1663、鄂紫为2.5458。

    2. 玫瑰花原花青素中单体及二聚体的HPLC分析方法,具体色谱条件为::分析柱:Eslipse XDB-C18,4.6mm×150mm5μm;流动相:A:乙腈B:1.0%冰醋酸(pH=2.71);洗脱梯度:0-10min:5-10%A;10-100min:10-25%A;流速:1.0ml/min;检测波长:280nm;柱温:30℃;进样量:20μl。在此条件下,四种物质(儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和原花青素B2)的分离度、方法的线性、精密度和加样回收率均符合要求。定量分析结果显示:原花青素B2的含量最高,达2.54%,表儿茶素含量为0.612%,表儿茶素没食子酸酯含量为0.257%。


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